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放线杆菌

        1  基因工程活疫苗的开发
        构建基因工程疫苗是研究细菌表面呈现系统的最初动因，基本策略是将病原体的保护性抗原或其表位在减毒或非病原菌表面表达，经口服途径，使重组菌在肠道内局限性生长繁殖，从而诱导机体产生免疫应答，以达到预防该病原体感染致病的目的。基因工程疫苗具有独特的优越性。首先，抗原呈现在表面，在免疫提呈方面可能更为有效。Stover等[52]的研究揭示在卡介苗表面表达的抗原诱发的免疫应答水平明显高于胞质中表达或分泌表达的融合蛋白所诱发的免疫应答水平，抗体效价可高l00-1000倍。其次，免疫佐剂作用明显。细菌的外膜脂多糖是一种强免疫原，怡好成为表面呈现抗原的免疫佐剂，而且许多载体蛋白如LamB、菌毛蛋白、脂蛋白等本身也具有很强的免疫原性，从而增强免疫效果。再者，宿主为减毒株或非病原菌，利于构建多价疫苗。对于革兰氏阴性菌来说，常用的就是大肠杆菌，由于其遗传背景比较清楚，在操作上更易于控制；减毒的沙门氏菌和卡介苗本身就是疫苗，表面呈现抗原后可成为多价苗；而且许多载体蛋白可允许多位点插入，从而更利于构建多价疫苗。

        细菌表面呈现系统是微生物表面呈现系统的一个重要分支，它是继噬菌体表面呈现系统之后发展起来的又一呈现系统，在一定程度上可以说是噬菌体呈现系统的替代途径，至少可以说是对噬菌体呈现系统的补充。其基本策略也是将外源蛋白或多肽与细菌表面蛋白融合或嵌合并活性表达于细菌表面。自从发现大肠杆菌外膜蛋LamB、OmpA和PhoE能够作为外源蛋白的表面呈现载体以来,该技术得到了迅猛发展，许多研究结果说明脂蛋白、菌毛蛋白、鞭毛蛋白等都可作为呈现载体。而且不仅革兰氏阴性菌可用以表面呈现，革兰氏阳性菌也可用以表面呈现。该技术已成为研究的热点，在微生物学、分子生物学、疫苗学等多个领域的基础和应用研究中得到了广泛应用。

        1  LamB
        LamB是革兰氏阴性菌外膜蛋白Porin家族成员，成熟的蛋白含有421个氨基酸残基，在菌体内以三聚体形式存在，形成非特异性跨膜通道，允许亲水性小分子的通过，另外它参与麦芽糖和麦芽糖糊精的转运，而且还是包括λ噬菌体在内的许多噬菌体的表面受体。利用X-线晶体衍射技术测定了LamB的三维结构[7]，证实LamB通过一系列ß折叠18次跨膜，形成9个朝向膜外的loop结构，其中L4(149-166)、L6(239-265)和L9(375一405)是三个主要的loop。LamB上有许多允许插入的位点，许多外源表位插入在153位氨基酸残基后获得了表达，374位也成功用于脊髓灰质炎病毒C3表位的呈现。三维结构显示L9是暴露最大的1oop，更适合外源表位的插入。汪江等将脊髓灰质炎病毒的C3表位和乙型肝炎病毒的pres2插在386位氨基酸残基后表达成功，并对多个位点同时插入外源表位进行了探讨。