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用甘油保存菌种的原理及方法
用甘油保存菌种的原理及方法R250(Coomassie brilliant blue R250),C45H44O7H3S2Na,,MW=824,λmax=560―590nm。染色灵敏度比氨基黑高5倍.尤其适用于SDS电泳微量蛋白质染色,但蛋白质浓度超出一定范围时,对高浓度蛋白的染色不符合Beer定律,用作定量分析时要注意这点。
G250,又名Xylene brilliant cyaninG。比考马斯亮蓝R250多二个甲基,MW=854,λmax=590―610nm。染色灵敏度不如R250,但比氨基黑高3倍,优点在于它在三氯乙酸中不溶而成胶体,能选择地染色蛋白而几乎无本底色,所以常用于需要重复性好和稳定的染色,适于作定量分析。
G250中的G就是Green,偏绿,R250中的R代表Red,偏红,在进行小分子量蛋白的Tricine电泳是常用G250染色,至于加热,染和脱色都可以加热,但都是在急需知道结果的情况下采用,加热后染的背景色很重脱色时间就长而且很难将背景色脱干净,脱色液经常加热会导致固定剂的会发,很快脱色剂就没用了,脱色效果很差,而且加热挥发出来的甲醛对呼吸道有刺激作用因此尽量不要加热!
Coomassie G (green)-250 is greenish, stains bright blue, is less soluble and used in colloidal form (stain enters a protein better than the acrylamide, so background is minimized). Coomassie R (red)-250 dye is reddish, stains dark blue and is more soluble, usually resulting in high background.
质粒不相容性(plasmid incom
April 7, 2008 09:35 | by


